Detekcja amplifikacji genu ERBB2

NordiQC to organizacja naukowa, której celem jest promowanie jakości metod badań molekularnych i rozszerzenie ich zastosowania klinicznego, poprzez opracowanie schematów badań biegłości immunohistochemicznej (IHC) i hybrydacji in situ (ISH). NordiQC oferuje moduł ISH raka piersi ERBB2, który obejmuje dwa roczne testy z testami CISH i FISH dla ERBB2 wykrywanego w tkankach utrwalonych w formalinie i zatopionych w parafinie (FFPE). Ze względu na centralną rolę testów ERBB2 w wyborze terapii raka piersi, standaryzacja testów ERBB2 ISH i interpretacja preparatów mają ogromne znaczenie kliniczne

Warunki testów

  • Każde uczestniczące laboratorium otrzymuje dwa razy w roku dwa niezhybrydyzowane szkiełka z tkanką FFPE zawierające 5 próbek raka piersi do analizy ERBB2 metodą/ami CISH i / lub FISH przy użyciu ich standardowego protokołu laboratoryjnego.
  • Wszystkie hybrydyzowane szkiełka zwrócone, przesłane protokoły i wypełnione arkusze oceny są oceniane przez radę doświadczonych patologów i techników w anonimowy sposób. Każde barwienie ocenia się konsensusowo jako optymalne, dobre, graniczne lub słabe.
  • Ogólne wyniki barwienia i wyniki analizy danych są publikowane online. Oceny indywidualne są przekazywane bezpośrednio do uczestniczących laboratoriów.
  • Interpretacje:

a) Każde uczestniczące laboratorium musiało przedłożyć arkusz ocen z interpretacją stosunku sygnału ERBB2 / CEN 17. Oceny te porównano z wynikami FISH ERBB2 uzyskanymi przez laboratoria referencyjne NordiQC.

b) Laboratorium referencyjne FISH zastosowało dwukolorową sondę ZytoLight ® SPEC ERBB2 / CEN 17 do badania ERBB2. Do interpretacji statusu ERBB2 zastosowano wytyczne ASCO / CAP 2013:

Niezamplifikowany: stosunek ERBB2 / CEN 17 <2,0 przy użyciu testu podwójnej sondy ze średnią <4 kopii genu ERBB2 na jądro (test podwójnej i pojedynczej sondy).

Niejednoznaczny: stosunek ERBB2 / CEN 17 <2,0 za pomocą testu podwójnej sondy ze średnią ≥ 4 i <6 kopii genu ERBB2 na jądro (test podwójnej i pojedynczej sondy).

Amplifikacja: stosunek ERBB2 / CEN 17 ≥ 2,0 za pomocą testu podwójnej sondy lub średnio ≥ 4 kopii genu ERBB2 na jądro. Przy użyciu testu z pojedynczą sondą średnio ≥ 6 kopii genu ERBB2 na jądro.

 

Wyniki oceny tury H13 2018

Część I – ocena techniczna wyników ERBB2 metodą CISH

Tab. 1. Ocena systemów CISH ERBB2

*- Optymalne barwienie – sygnały i stosunek sygnałów ERBB2/CEN 17 można ocenić we wszystkich czterech tkankach
**- Dobre barwienie - stosunek sygnałów ERBB2/CEN 17 można ocenić we wszystkich tkankach, ale interpretacja była nieco skomplikowana, np. z powodu słabego lub przesadnego barwienia
***- Graniczne barwienie – Jedną z tkanek można było ocenić właściwie, np. z powodu słabych sygnałów, dużych obszarów negatywnych z brakiem sygnału lub dużego tła barwienia.
****- Słabe barwienie – Dwie lub więcej tkanek nie można było ocenić właściwie, np. z powodu słabych sygnałów, dużych obszarów negatywnych z brakiem sygnału lub dużego tła barwienia.
Suff. OPS – Proporcja zadowalających barwień z optymalnym protokołem.

Część II – ocena wyników ERBB2 metodą FISH

Tab. 2. Zastosowane Testy FISH i stosunki zgodności w porównaniu do danych referencyjnych NordiQC.

 

Część III – zgodność pomiędzy wskaźnikami zgodności CISH/FISH a NordQC

Ogólnie, zarówno w przypadku CISH, jak i FISH, zaobserwowano wysokie wskaźniki zgodności między uczestniczącymi laboratoriami i danymi referencyjnymi NordiQC dotyczącymi statusu amplifikacji ERBB2 we wszystkich tkankach (rys. 2). Laboratoria wykonujące FISH osiągnęły nieco wyższy (85%) wskaźnik zgodności dla interpretacji statusu amplifikacji ERBB2 w porównaniu z laboratoriami wykonującymi test metodą CISH (82%).

Wnioski – ocena tury H13 2018

  • Dwukolorowa sonda ZytoLight ® SPEC ERBB2 / CEN 17 została użyta do testowania FISH ERBB2 w jednym z laboratoriów referencyjnych NordiQC.
  • Optymalne wyniki CISH ERBB2 można uzyskać, stosując sondę dwukolorową ZytoDot ® 2C SPEC ERBB2 / CEN 17 i sondę jednokolorową ZytoDot®SPEC ERBB2.
  • Wszystkie uczestniczące laboratoria FISH stosujące sondę dwukolorową ZytoLight ® SPEC ERBB2 / CEN 17 lub sondę dwukolorową ZytoLight ® CEN 17 / SPEC ERBB2 osiągnęły 100% zgodności.
  • Obie metody (CISH i FISH) doprowadziły do porównywalnych wyników 

 

Wyniki oceny tury H15 2019

Część I – ocena techniczna wyników ERBB2 metodą CISH

Tab. 3. Ocena systemów CISH ERBB2

*- Optymalne barwienie – sygnały i stosunek sygnałów ERBB2/CEN 17 można ocenić we wszystkich czterech tkankach
**- Dobre barwienie - stosunek sygnałów ERBB2/CEN 17 można ocenić we wszystkich tkankach, ale interpretacja była nieco skomplikowana, np. z powodu słabego lub przesadnego barwienia
***- Graniczne barwienie – Jedną z tkanek można było ocenić właściwie, np. z powodu słabych sygnałów, dużych obszarów negatywnych z brakiem sygnału lub dużego tła barwienia.
****- Słabe barwienie – Dwie lub więcej tkanek nie można było ocenić właściwie, np. z powodu słabych sygnałów, dużych obszarów negatywnych z brakiem sygnału lub dużego tła barwienia.
Suff. OPS – Proporcja zadowalających barwień z optymalnym protokołem.

 

Część II – ocena wyników ERBB2 metodą FISH

Tab. 4. Zastosowane Testy FISH i stosunki zgodności w porównaniu do danych referencyjnych NordiQC.

 

Część III – zgodność pomiędzy wskaźnikami zgodności CISH/FISH a NordiQC

Ogólnie, zarówno w przypadku CISH, jak i FISH, zaobserwowano wysokie wskaźniki zgodności między uczestniczącymi laboratoriami i danymi referencyjnymi NordiQC dotyczącymi statusu amplifikacji ERBB2 we wszystkich tkankach (rys. 4). Laboratoria wykonujące FISH osiągnęły nieznacznie wyższy (88%) wskaźnik zgodności dla interpretacji statusu amplifikacji ERBB2 w porównaniu do laboratoriów wykonujących CISH (78%). Laboratorium firmy ZytoVision uczestniczyło w tej próbie z sondą ZytoDot ® 2CSPECERBB2 / CEN17 oraz sondą dwukolorową FlexISH® ERBB2 / CEN 17 (2 godziny i protokoły hybrydyzacji przez noc). Przedstawione wyniki punktacji wykazały 100% zgodność z danymi punktacji NordiQC.

 

Wnioski – ocena tury H15 2019

  • Sonda dwukolorowa ZytoLight ® SPEC ERBB2 / CEN 17 została wykorzystana do badania FISH ERBB2 w jednym z laboratoriów referencyjnych NordiQC
  • Optymalne wyniki CISH ERBB2 można uzyskać za pomocą testu dwukolorowego ZytoDot® 2C SPEC ERBB2 / CEN 17 oraz jednokolorowego sondą ZytoDot®SPEC ERBB2
  • Laboratorium ZytoVision osiągnęło 100% zgodność przy użyciu sondy ZytoDot ® 2C SPEC ERBB2 / CEN 17 i sondy dwukolorowej FlexISH® ERBB2 / CEN 17.
  • Obie metody (CISH i FISH) doprowadziły do porównywalnych wyników.  
This website uses cookies Find out more Cookies are small text files, stored by the web browser on users device. Used for statistical analysis of traffic, matching the look and content to suit your needs. By leaving cookies unblocked in your browser, you agree to their use. If you do not agree to the use of cookies, change the settings of your browser. Accept